| ポリハイドロキシエチル ATM(PolyHYDROXYETHYL AspartamideTM) |
シリカ系ゲル濾過HPLCカラム
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ポリハイドロキシエチルAカラムは、ポリエルシー社が親水クロマトグラフィ用として、特別に開発した中性で親水性の担体ですが、この担体を有機溶媒濃度が30%以下の移動相で使用すると、ペプチドやその他低分子量物質がゲル濾過分離モードとして利用できます。しかも移動相溶媒を単に変えるだけで、二つの異なる分子量分画範囲で使用することができます(下図22.参照)。 |
このことにより、分子量分画範囲が極端に低分子量側へシフトします。したがって、ぎ酸のような低分子量物質(46ダルトン)もサイズで分離することが可能です。加えて、ぎ酸を移動相として使用すると、揮発性ですので直接オンラインで質量分析装置へ負荷することができます。 ポリハイドロキシエチルA 60Å孔径カラムを50mMぎ酸の移動相で使用しますと、分子量分画範囲が20〜600ダルトンとなります。この分画範囲は従来のゲル濾過カラムでは不可能な分離範囲です。このことにより、従来ではできなかったジペプチド(二量体)サンプルからの脱塩や、目的低分子量物質を余剰に残存していて、目的物質よりも小さい誘導体反応試薬などから分離することができます。 |





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ゲル濾過分離モードによる分子量分画範囲(ダルトン) |
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| 充填剤孔径 | 変性溶媒移動相 (50mMぎ酸) |
通常移動相 (りん酸/硫酸バッファー) |
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| 60Å | 40-600 | 40-N.D. | |
| 200Å |
40-1,600 |
200-25,000 | |
| 300Å | 40-40,000 | 300-100,000 | |
| 500Å | 40-150,000 | 400-300,000 | |
| 1000Å | 40-1,000,000 | 1,000-2,000,000 | |